Lipase and Phospholipase Protocols

پروتکل‌های لیپاز و فسفولیپاز مجموعه‌ای جدید و مهم از تکنیک‌ها و استراتژی‌های پیشرفته برای توصیف، خالص‌سازی و بیان لیپازها و فسفولیپازهای پستانداران است. این روش ها شامل تهیه انواع سوبستراهای نشاندار شده و فلورسنت برای تعیین فعالیت لیپولیتیک، استراتژی های اثبات شده برای بیان و خالص سازی لیپازها و فسفولیپازهای نوترکیب، و شناسایی لیپازها با تکنیک هایی مانند شناسایی ایمنی، تعیین اندازه زیر واحد، سینتیک لیپاز است. و تعاملات لیگاندی علاوه بر این، روش‌هایی برای آنالیز مولکولی و ژنتیکی لیپازها، تعیین کمیت سطوح mRNA و رونویسی/ترجمه جفت شده در شرایط آزمایشگاهی وجود دارد. این پروتکل‌ها بیش از ده‌ها آنزیم خاص را پوشش می‌دهند و بسیاری از آن‌ها را می‌توان مستقیماً روی تمام لیپازها و فسفولیپازها اعمال کرد.

پروتکل‌های لیپاز و فسفولیپاز یک کتاب راهنمای تک جلدی بسیار مفید از روش‌ها و استراتژی‌های اساسی برای بررسی این کلاس منحصر به فرد است. از آنزیم ها فرمت گام به گام آن به خوبی روی میز آزمایشگاه یا کامپیوتر کار می کند و اطلاعات و نمونه های عملی را ارائه می دهد که منجر به طراحی و اجرای موفق تکنیک های خاص می شود. این نه تنها یک چارچوب فنی برای بررسی لیپازها و فسفولیپازهای شناخته شده فراهم می کند، بلکه روش های تثبیت شده ای را ارائه می دهد که به آسانی با کشف آنزیم های جدید لیپاز سازگار است.

Lipase and Phospholipase Protocols is an important new compilation of cutting-edge techniques and strategies for the characterization, purification, and expression of mammalian lipases and phospholipases. The methods include the preparation of a variety of radiolabeled and fluorescent substrates for the determination of lipolytic activity, proven strategies for the expression and purification of recombinant lipases and phospholipases, and the characterization of lipases by such techniques as immunodetection, subunit size determination, lipase kinetics, and ligand interactions. In addition, there are methods for the molecular and genetic analysis of the lipases, the quantification of mRNA levels, and in vitro-coupled transcription/translation. The protocols cover more than a dozen specific enzymes, and many can be applied directly to all lipases and phospholipases.

Lipase and Phospholipase Protocols constitutes a highly useful single-volume handbook of basic procedures and strategies to investigate this unique class of enzymes. Its step-by-step format works perfectly at the laboratory bench or by the computer, providing practical information and examples that will lead to successful design and execution of specific techniques. It not only furnishes a technical framework for the investigation of known lipases and phospholipases, but provides well-established methods readily daptable to the discovery of new lipase enzymes.